联方广州总代 中山艾杰尔同位素内标

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流动相的一般选择要求： 1.纯度：所有溶剂都应具有高的纯度和质量。HPLC 级溶剂经过预过滤和纯化，在紫外线下具有小的吸光度。因此，它们不含会在色谱图基线中产生假峰的杂质。缓冲液制备中使用的水具有高纯度。去离子水通常含有痕量有机化合物，因此不推荐用于HPLC。

2.粘度：为了保持可接受的压降 (lt; 2500 psi) 和合理的流过HPLC色谱柱的流速，流动相粘度应尽可能低。较低粘度的流动相产生较窄的色谱峰。例如通常是反相 HPLC 的溶剂，因为它不仅粘度低于或，而且具有良好的保留特性。

3.沸点：如果涉及样品回收，沸点很重要，低沸点溶剂更容易从样品中去除。

4.无腐蚀性：溶剂必须对 HPLC 系统组件无腐蚀性。

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装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂 “走柱子”，本法大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。接着是用淋洗剂“走柱子”，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。干法装柱较方便，但大的缺陷在于“走柱子”时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到），容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如，更为明显。虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉，但是，一旦撤去压力，如在上样、加溶剂等操作的时候，气泡就会释放出来，严重时，整个柱子变花，样品不可能平整地通过，当然也就谈不上分离了。解决的办法是：、硅胶一定要填结实；第二、一定要用较多的溶剂“走柱子”，一定要到柱子的下端不再发烫，恢复到室温后再撤去压力。也有介绍在硅胶的上层填上一小层石英砂，防止添加溶剂的时候，使得样品层不再整齐。但是如果小心上样，添加溶剂，则没有这个必要。

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有问“液相色谱柱安装步骤”，下面就来科普一下。液相色谱柱由柱管、压帽、卡套、筛板、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，为提高柱效，减小管壁效应，艾杰尔同位素内标，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。

液相色谱柱安装步：打开包装，确认型号，尺寸，出厂日期和柱子内存的溶剂填料；

第二步：拧下柱子两端的密封堵头放回包装盒供备用，安装柱子标明的流动相，把色谱柱端口通过连接管和进样阀相互连接，如果有条件，配套使用保护柱，用来收集、阻断来自进样器的机械和化学杂质，以保护和延长分析柱的使用寿命。

第三步：柱子出口和检测器连接，连接的两端有空心螺纹钉和密封用压环。在接管的时候需要降低柱管的死体积。连接管通过空心螺钉后要插到底。然后拧紧空心螺钉。可以借助扳手拧紧，注意不要用力过大或者拧滑丝了。

以上就是液相色谱柱安装步骤。

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